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分光光度计的结构组成及光谱范围

更新时间:2023-01-11      点击次数:764
  分光光度计是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。
 
  分光光度计的仪器组成:
 
  分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
 
  仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。
 
  分光光度计的光谱范围:
 
  包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200~400 nm的紫外光区.不同的光源都有其发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。
 
  钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400~760nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红橙,黄绿,蓝靛,紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
 
  氢灯(或氘灯)的发射光谱:氢灯能发出185~400 nm波长的光谱可作为紫外光光度计的光源。
 
  如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱。
 
  不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质。
 
  当光线通过某种物质的溶液时透过的光的强度减弱.因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被组成此溶液的物质所吸收只有一部分光可透过溶液。
 
  入射光=反射光+分散光+吸收光+透过光。
 
  如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失则:
 
  入射光=吸收光十透过光
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